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- 英文名稱：Rat Pyruvate kinase isozymes M2elisa Kit
- 品牌：瑞清
- 產(chǎn)地：深圳
- 貨號(hào)：RQ-sw13832
- 價(jià)格： ￥1750/盒
- 發(fā)布日期： 2023-02-15
- 更新日期： 2024-11-20
| 產(chǎn)地 | 深圳 |
| 保存條件 | 2-8℃ |
| 品牌 | 瑞清 |
| 貨號(hào) | RQ-sw13832 |
| 用途 | 用于科研實(shí)驗(yàn)使用 |
| 檢測(cè)方法 | 酶聯(lián)免疫法 |
| 保質(zhì)期 | 6個(gè)月 |
| 適應(yīng)物種 | 人,小鼠,大鼠,植物,魚,蝦,蟹,牛,羊,狗,貓,微生物,細(xì)胞,土壤等動(dòng)植物 |
| 檢測(cè)限 | 詳詢 |
| 數(shù)量 | 100 |
| 英文名稱 | Rat Pyruvate kinase isozymes M2elisa Kit |
| 包裝規(guī)格 | 96T |
| 標(biāo)記物 | HRP |
| 樣本 | 血清.血漿.組織.相關(guān)液體等 |
| 應(yīng)用 | 僅供科研使用 |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
檢測(cè)原理
試劑盒采用雙抗原一-步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA) 。往預(yù)先包被病毒抗ti的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗原,經(jīng)過溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在suan的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450NM波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值) ,與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中豬病毒(BVDV) 的存在與否。
樣品收集、處理及保存方法
1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.血漿: EDTA、檸檬suan鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3.細(xì)胞上清液: 3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn) 離心10分鐘取上清。
5.保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20°C, 避免反
復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1.酶標(biāo)儀(450NM)
2.高精度加樣器及槍頭: 0.5-10UL、 2-20UL、 20-200UL、 200-1000UL
3.37℃恒溫箱
操作注意事項(xiàng)
1.試劑盒保存在2-8°C,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?，F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完quan溶解后再使用。
2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.預(yù)處理后的樣本請(qǐng)按照操作步驟用樣ben稀釋ye適當(dāng)稀釋以達(dá)到試劑盒的檢測(cè)效果。.
4.嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5.所有液體組分使用前充分搖勻。
常用方法:
1. 夾心法:
夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原,一般的操作步驟為:
a. 將具有專一性的抗ti固著(coating)于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗ti
b. 加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的抗原,則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗ti進(jìn)行專一性鍵結(jié)
c. 洗去多余待測(cè)檢體,加入另一種對(duì)抗原專一的一次抗ti,與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié)
d. 洗去多余未鍵結(jié)一次抗ti,加入帶有酶的二次抗ti,與一次抗ti鍵結(jié)
e. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗ti,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果
原理:針對(duì)抗原分子上2個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗ti分別作為固相抗ti和酶標(biāo)抗ti,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物。
2. 間接法
間接法常用于檢測(cè)抗ti,一般的操作步驟為:
a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余的抗原。
b. 加入待測(cè)檢體,檢體中若含有待測(cè)的一次抗ti,則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié)。
c. 洗去多余待測(cè)檢體,加入帶有酶的二次抗ti,與待測(cè)的一次抗ti鍵結(jié)。
d. 洗去多余未鍵結(jié)二次抗ti,加入酶底物使酶呈色,藉儀器(ELISA reader)測(cè)定塑膠盤中的吸光值(OD值),以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可 測(cè)量待測(cè)抗ti的含量。
原理:利用酶標(biāo)記的抗抗ti以檢測(cè)已與固相結(jié)合的受檢抗ti。
3. 競(jìng)爭(zhēng)法
競(jìng)爭(zhēng)法是一種較少用到的ELISA檢測(cè)機(jī)制,一般用于檢測(cè)小分子抗原,其操作步驟為:
a. 將具有專一性的抗ti固著于塑膠孔盤上,完成后洗去多余抗ti
b. 加入待測(cè)檢體,使檢體中的待測(cè)抗原與塑膠孔盤上的抗ti進(jìn)行專一性鍵結(jié)
c. 加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗ti進(jìn)行專一性鍵結(jié),由于塑膠孔盤上固著的抗ti數(shù)量有限,因此當(dāng)檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗ti就越少,亦即,兩種抗原皆競(jìng)相與塑膠孔盤上抗ti鍵結(jié),即所謂競(jìng)爭(zhēng)法之由來。
d. 洗去檢體與帶有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,當(dāng)檢體中抗原量越多,代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少,顯色也就越淺。
e. 當(dāng)需要偵測(cè)無法獲得兩種以上單一性抗ti的抗原,或是不易得到足夠的純化抗ti以固著于孔盤上時(shí),一般會(huì)考慮使用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA。
免責(zé)聲明:
1. 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
訂購(gòu)說明:
※關(guān)于產(chǎn)品售價(jià),由于市場(chǎng)的不穩(wěn)定性,價(jià)格變動(dòng)是必然的,但是我們可以提供當(dāng)下公允的市場(chǎng)價(jià)格,批量訂購(gòu)還可享受相應(yīng)的優(yōu)惠活動(dòng);
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